گزینه دوم ترتیب رو درست گفته یعنی قبل از لیگاز، آنزیم برش دهنده داریم ولی اینکه اون آنزيم حتما Ecor1 غلطه...
چون کتاب گفته از آنزیم های برش دهنده در مرحله اول استفاده میشه مثل... Ecor1
بعد تولید دنای نوترکیب در مرحله دوم هست که چون باید دیسک برش بخوره باید آنزیمی مشابه مرحله اول باشه که همون Ecor1 هست، ولی ممکنه که در مرحله اول آنزیم برش دهنده دیگه ای استفاده شده باشه.. و قطعا نمیشه گفت حتما Ecor1 استفاده شده.